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miRNA做完熒光定量需要跑焦嗎？
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我反轉錄時用的頸環(huán)引物，real-time用的Taqman探針，特異性方面應該沒問題吧，但是做了一個無模板對照竟然也有產物，所以其他的結果也都不可靠了，就想跑焦看一下片段長度。（雖然也可能是樣太多我加錯了，不過可能性不大） 但是跑焦的話目的片段應該是有多長呢？用的產品里面沒有說明各種引物的長度，我查了一些別人做的引物設計，好像最終結果是比原有的miRNA長40bp，是這樣嗎？ 還有就是用聚丙烯酰胺凝膠電泳的話多大濃度合適？ 在此請教各位，望不吝賜教，謝謝�。� |
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bullfrog325
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2樓2013-05-16 17:25:33
3樓2013-05-16 19:01:49
bullfrog325
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【答案】應助回帖
★ ★
amisking: 金幣+2, 鼓勵積極發(fā)帖幫助解答問題。 2013-05-16 22:46:43
amisking: 金幣+2, 鼓勵積極發(fā)帖幫助解答問題。 2013-05-16 22:46:43
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樓主這個不像是引物啊, 像是一個miRNA前體. 你可以把你的"引物"序列用網上預測RNA折疊的工具看看, 比如: http://rna.tbi.univie.ac.at/cgi-bin/RNAfold.cgi |
4樓2013-05-16 20:30:56
5樓2013-05-17 14:47:26
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