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louveffy新蟲 (初入文壇)
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PITC法測(cè)氨基酸 已有1人參與
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用PITC測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品L-蘇氨酸,衍生效果一直不好,沒有出現(xiàn)物質(zhì)峰,而且后面雜質(zhì)峰特別多,不知道怎么回事,在此請(qǐng)教一下各位,如果你們有好的方法,麻煩發(fā)我郵箱下,謝啦!1515419055@qq.com。 溶液配制:用0.1mol/L鹽酸配制500mg/L L-蘇氨酸;用乙腈配制4.2g/L的PITC 測(cè)定步驟:取200uL L-蘇氨酸置于1.5mL進(jìn)樣瓶中,再加入100uLPITC,混勻,在30℃水浴下反應(yīng)1小時(shí),然后取400uL正己烷加入,震蕩充分后,靜置分層,取200uL下清液,接著再取800uL純水,最后用0.22um針式過(guò)濾器過(guò)濾,將濾液轉(zhuǎn)入1.5mL進(jìn)樣瓶中,進(jìn)樣分析。 色譜條件:1.HC-C18 4.6*250mm 2.波長(zhǎng):254nm;柱溫:38℃;流速:1mL/min 3.流動(dòng)相A:0.1mol/L乙酸鈉+乙腈=97:3 流動(dòng)相B:乙腈+水=4+1 梯度 時(shí)間 A B 0 100 0 13 93 7 23 77 23 29 65 35 35 60 40 40 0 100 45 0 100 50 60 40 60 77 23 65 100 0 ni (2).jpg |
新蟲 (初入文壇)
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