 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (5747)
- >導(dǎo)師招生 (1130)
- >考研 (1047)
- >文獻(xiàn)求助 (416)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (401)
- >休閑灌水 (179)
- >碩博家園 (123)
- >招聘信息布告欄 (121)
- >考博 (119)
- >論文投稿 (106)
- >基金申請(qǐng) (93)
- >博后之家 (86)
- >綠色求助(高懸賞) (40)
- >SciFinder/Reaxys (36)
- >論文道賀祈福 (32)
- >找工作 (32)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2328 | 回復(fù): 11 | |||
icanplay90銅蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
gateway體系連ENtry載體
|
||
| 最近構(gòu)建gateway體系的入門(mén)載體，體系是pcr產(chǎn)物2ul，vector0.5ul,鹽溶液0.5ul。 之前用的時(shí)候，轉(zhuǎn)化一次，雖然長(zhǎng)的點(diǎn)不多，但一般都有陽(yáng)性克隆。這次想連一個(gè)啟動(dòng)子加基因全長(zhǎng)的片段，大約6900bp左右。反應(yīng)的條件是22度30min。長(zhǎng)了八個(gè)點(diǎn)，但是今天上午一鑒定，全是假陽(yáng)性。。。這是為什么呀為什么？求指教問(wèn)題出那了。。。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有252人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
2樓2013-05-31 18:57:21
icanplay90
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 103.3
- 帖子: 15
- 在線: 12.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 988315
- 注冊(cè): 2010-04-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生殖生物學(xué)
3樓2013-05-31 20:41:09
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
4樓2013-05-31 20:57:31
icanplay90
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 103.3
- 帖子: 15
- 在線: 12.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 988315
- 注冊(cè): 2010-04-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生殖生物學(xué)
5樓2013-06-05 21:07:30
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
6樓2013-06-05 22:08:36
icanplay90
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 103.3
- 帖子: 15
- 在線: 12.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 988315
- 注冊(cè): 2010-04-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生殖生物學(xué)
|
對(duì) 沒(méi)有菌落生長(zhǎng) 感受態(tài)是實(shí)驗(yàn)室剛制備的。。。應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題 載體都是從公司里買(mǎi)的，產(chǎn)物是用phusion酶擴(kuò)的，gateway的位點(diǎn)應(yīng)該就是在上游引物5‘端加上CACC吧，抗性板是卡那抗性的，載體是卡那潮霉素雙抗的，板都是一起配的，別人卡那抗性的菌落可以生長(zhǎng)，然后PCR產(chǎn)物，我濃縮以后跑過(guò)電泳，加了3ul，帶的亮度還可以，而且，我用PCR產(chǎn)物做模板擴(kuò)過(guò)該片段中間的一條帶，也亮度很好。我還以pcr產(chǎn)物為模板，上游單引物擴(kuò)過(guò)一次，條件跟擴(kuò)基因的時(shí)候是相同的，產(chǎn)生了彌散的條帶，從1000左右到6800左右的大亮斑。 還有個(gè)問(wèn)題，濃縮之后的濃度接近400ng/ul，用不用稀釋?zhuān)咳绻螡舛冗^(guò)高會(huì)不會(huì)影響反應(yīng)？ |
7樓2013-06-05 23:39:10
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
8樓2013-06-05 23:54:07
icanplay90
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 103.3
- 帖子: 15
- 在線: 12.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 988315
- 注冊(cè): 2010-04-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生殖生物學(xué)
9樓2013-06-06 00:06:35
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
10樓2013-06-06 03:43:20
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 icanplay90 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | 大口吃飯 身體健 2026-03-13 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑 +4 | Du.11 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +8 | 冬十三 2026-03-15 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +3 | 睿08 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級(jí)已過(guò)，有科研經(jīng)歷 +7 | 曦熙兮 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +8 | 秋有木北 2026-03-14 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
NSFC申報(bào)書(shū)里申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷中代表性論著還需要在申報(bào)書(shū)最后的附件里面再上傳一遍嗎
 20+5
|
NSFC2026我來(lái)了 2026-03-10 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【0703化學(xué)調(diào)劑】-一志愿華中師范大學(xué)-六級(jí)475 +5 | Becho359 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 308 085701 四六級(jí)已過(guò)求調(diào)劑 +7 | 溫喬喬喬喬 2026-03-12 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 材料專(zhuān)碩288分求調(diào)劑 一志愿211 +4 | 在家想你 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | zjy101327 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 工科，求調(diào)劑 +3 | 我887 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 315求調(diào)劑 +9 | 小羊小羊_ 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿211化學(xué)學(xué)碩310分求調(diào)劑 +8 | 努力奮斗112 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問(wèn)題
5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|