 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5738 | 回復: 51 | ||||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
sherrysure銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
我的蛋白序列鑒定都是正確的，可是為什么就是不表達，是為什么呢？附SDS-PAGE圖
|
|||
|
這3個月一直在做蛋白表達， 但是一直沒有成功。 我是這樣做的： 把擴增出來的目的條帶連接到pMD18TSimple，轉化到Top10； 選擇PCR與測序鑒定結果都正確的陽性菌液，提質粒，酶切，回收目的條帶； 酶切后目的條帶連接到pET30a載體，轉化到Rosetta； 菌液PCR和測序鑒定結果正確的陽性菌液擴大培養(yǎng)，在0、2、4、6、8h取樣做SDS-PAGE； 得到的結果就是沒有結果  期間也試過以下表達載體：pET28b、pET30a、pET32a 選擇的酶切位點是BamHI、XhoI，都對應載體圖譜數(shù)過，不會存在移碼的問題。 分別也都嘗試過感受態(tài)：BL21、Rosetta 但是結果都是不表達，跑出來與上面類似的圖 迫切尋求幫助，請求高手指導~~感激不盡！ page.jpg [ Last edited by sherrysure on 2013-6-6 at 14:47 ] |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸生物學實驗經(jīng)驗 | 蛋白質生物學實驗經(jīng)驗 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有226人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調劑
已經(jīng)有0人回復
-
湖北師范大學招調劑啦
已經(jīng)有3人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 如果在NCBI上查得的序列是某個蛋白mRNA的partial cds，那能做克隆表達嗎
已經(jīng)有4人回復
- 序列比對軟件的選擇和進化樹制作
已經(jīng)有9人回復
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結果正確為何不表達
已經(jīng)有7人回復
- 蛋白氨基酸序列分析及二、三、四級結構的鑒定
已經(jīng)有33人回復
sherrysure
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1117.5
- 散金: 8
- 紅花: 2
- 帖子: 121
- 在線: 82.4小時
- 蟲號: 1285648
- 注冊: 2011-05-04
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學
3樓2013-06-06 18:20:27
linxt2005
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應助: 40 (小學生)
- 金幣: 1250.3
- 紅花: 2
- 帖子: 185
- 在線: 141.1小時
- 蟲號: 2062910
- 注冊: 2012-10-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質組學
2樓2013-06-06 16:48:10
xiaoweiwei121
榮譽版主 (文壇精英)
這潭水藍的深邃
- MolEPI: 5
- 應助: 18 (小學生)
- 貴賓: 39.097
- 金幣: 106416
- 散金: 2773
- 紅花: 197
- 沙發(fā): 109
- 帖子: 35580
- 在線: 2157.8小時
- 蟲號: 426591
- 注冊: 2007-07-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 蛋白質組學
- 管轄: 蟲友互識
4樓2013-06-06 23:59:39
dshlove
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 17
- 應助: 237 (大學生)
- 金幣: 4764.7
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 帖子: 852
- 在線: 419.2小時
- 蟲號: 1609389
- 注冊: 2012-02-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 污染控制化學
5樓2013-06-07 10:37:23
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北京化工大學材料與化工（085600）296求調劑 +25 | 稻妻小編 2026-03-26 | 25/1250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿：西北大學，英一數(shù)一408-284分求調劑 +5 | 12.27 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 309求調劑 +15 | 誰不是少年 2026-03-29 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 298求調劑 +3 | 什么是胖頭魚 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[碩博家園] 求調劑 有機化學考研356分 +10 | Nadiums 2026-03-25 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 348求調劑 +6 | 小懶蟲不懶了 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調劑 +10 | lin0039 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +4 | QiMing7 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 299求調劑 +10 | 15188958825 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 330分求調劑 +5 | qzenlc 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調劑 +6 | 崔wj 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京航空航天大學材料學碩求調劑 +3 | @taotao 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調劑，各位老師看看我�。。� +5 | 祁祺祺 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化學調劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調劑 +4 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分調劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調劑 +4 | 崔wj 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調劑】制藥工程 284分 求相關專業(yè)調劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|