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xingxingkids金蟲 (著名寫手)
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[求助]
關(guān)于合成的引物DNA序列在260nm處沒有吸收峰，是怎么回事？？
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| 合成的引物，經(jīng)過離心溶解后，進(jìn)行紫外測試，結(jié)果在260nm處竟然沒有吸收峰，請問可能是什么原因，謝謝！！ |
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DNA是線狀高分子，12000rpm處理5min引起的剪切力絕對不可能不會損壞DNA！不信直接用質(zhì)譜檢測12000rpm處理5min前后的DNA的分子量的質(zhì)譜峰有沒有變化。 有人說12000rpm處理5min絕對不會損壞DNA呢？？----其實(shí)驗(yàn)依據(jù)是什么？！------有人還說上帝存在哪！ 如果你認(rèn)為：你合成的DNA是否出現(xiàn)在溶液中有問題，最簡單的試驗(yàn)檢測方法，直接用MS檢測溶液中的生物大分子的相對分子量！ |
9樓2013-06-14 23:16:25
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2樓2013-06-08 17:30:19
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 是不是你的樣品濃度太大了，這時(shí)紫外光譜可能測不來。如果你的樣品中可能混有其他的大分子DNA則要用鉬酸銨-過氯酸沉淀劑（鉬酸銨0.25%,過氯酸2.5%)沉淀離心后取上清液測定紫外260nm吸收峰。鉬酸銨-過氯酸沉淀劑（鉬酸銨0.25%,過氯酸2.5%)制備方法:取3.6mL70%過氯酸和0.25g鉬酸銨溶于96.4mL蒸餾水。 |
3樓2013-06-08 17:45:14
xingxingkids
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4樓2013-06-08 17:55:32
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