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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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yang824

木蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 吸光度和樣品稀釋問(wèn)題

你好，向大家請(qǐng)教一下，我的是要做總糖含量測(cè)定，但是我的葡萄糖標(biāo)線讀數(shù)最小的就是1.7，后面幾個(gè)濃度讀數(shù)都一樣，這是不是就說(shuō)明我的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品濃度過(guò)大，需要稀釋呢，我目測(cè)我的樣品顏色比葡萄糖深好多，是不是更加需要稀釋，而且樣品要比標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)更大，這樣做會(huì)不會(huì)誤差也很大，我應(yīng)該具體怎么稀釋能讓我的樣品的吸光度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線上面呢？另外，是所有的紫外分光光度計(jì)的讀書(shū)都是在0.2-0.8之間是最準(zhǔn)確的嗎？希望賜教！萬(wàn)分感謝�。。�！

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1樓 2013-06-09 06:13:09

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zhupeilei

木蟲(chóng) (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
yang824: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-06-13 09:30:13

引用回帖:

6樓: Originally posted by yang824 at 2013-06-09 09:36:06
我這樣問(wèn)不知道你能不能理解：標(biāo)線稀釋了10倍，得到的OD要乘以稀釋倍數(shù)就是10，才是原來(lái)標(biāo)線的OD，對(duì)吧，然后樣品要是也想稀釋同樣的倍數(shù)，得到的OD直接在標(biāo)線上找出對(duì)應(yīng)的含糖量，含糖量再乘以稀釋倍數(shù)是樣品正常 ...

我覺(jué)得不對(duì)。OD值是不應(yīng)該換算的，能換算的只能是濃度。你的稀釋只是把樣品濃度稀釋了，而不是OD值。我覺(jué)得應(yīng)該是這樣子的：首先，將標(biāo)線按10或者其他倍數(shù)濃度稀釋，稀釋之后的濃度是可以算出來(lái)吧，OD也是可以測(cè)出來(lái)的。這樣就有了濃度和吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后你的樣品按一定倍數(shù)稀釋，稀釋之后的OD能在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到一個(gè)濃度值，這個(gè)濃度乘以樣品的稀釋倍數(shù)，就是樣品的濃度了。不用考慮標(biāo)線原來(lái)的濃度，濃度可以換算，OD不可以。

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特立獨(dú)行

7樓2013-06-09 12:04:16

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Andyllk

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【答案】應(yīng)助回帖

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yang824: 金幣+1, ★有幫助 2013-06-13 09:31:45

假如你標(biāo)線稀釋10倍，樣品稀釋50倍的話，計(jì)算總糖時(shí)要乘于的稀釋倍數(shù)是(50/10=5)，即乘于5。盡量使吸光度落在0.2-0.8這樣精確些，所以你的標(biāo)線和樣品都要稀釋到0.2-0.8。但是稀釋倍數(shù)可以不一樣，到時(shí)候按上面的方法算就行。如果你不想麻煩，可以增大你的分取倍數(shù)

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8樓2013-06-09 14:17:05

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zhupeilei

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【答案】應(yīng)助回帖

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9樓: Originally posted by yang824 at 2013-06-13 09:31:19
我用硫酸苯酚法測(cè)總糖含量，DNS法測(cè)還原糖含量，但是葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品和樣品在測(cè)總糖的時(shí)候吸光值超過(guò)了紫外范圍，所以我就稀釋了一百倍做的，然后還原糖的時(shí)候沒(méi)有稀釋（還原糖要是稀釋測(cè)不出來(lái)吸光值），現(xiàn)在結(jié)果是還 ...

我沒(méi)測(cè)過(guò)糖。能想到的只有兩點(diǎn)：1. 濃度換算有沒(méi)有出錯(cuò)。 2. 實(shí)驗(yàn)操作誤差是不是沒(méi)控制好呢。

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特立獨(dú)行

12樓2013-06-14 11:53:09

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heyj1234

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yang824: 金幣+1, ★有幫助 2013-06-09 08:02:23
zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助 2013-06-09 11:07:30

基本上讀數(shù)落在0.2-0.8.不可以稀釋3倍或4倍再進(jìn)行操作，結(jié)果就比較精確。祝成功！

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激情的時(shí)代

2樓2013-06-09 06:44:08

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zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助 2013-06-09 11:07:10

基本上讀數(shù)落在0.2-0.8.可以稀釋3倍或4倍再進(jìn)行操作，結(jié)果就比較精確。祝成功

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激情的時(shí)代

3樓2013-06-09 06:44:34

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2樓: Originally posted by heyj1234 at 2013-06-09 06:44:08
基本上讀數(shù)落在0.2-0.8.不可以稀釋3倍或4倍再進(jìn)行操作，結(jié)果就比較精確。祝成功！

標(biāo)線稀釋3倍或4倍，那樣品是不是要稀釋的更多倍數(shù)

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4樓2013-06-09 07:55:43

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zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助 2013-06-09 11:07:15

我一般是按照梯度稀釋法10倍，100倍這樣稀釋的，最好是能一步稀釋到位，而且樣品和標(biāo)品應(yīng)該稀釋相同的倍數(shù)，否則誤差很大。吸光度不一定非要在0.2~0.8之間，0~1之間就很合理了。

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特立獨(dú)行

5樓2013-06-09 08:03:28

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5樓: Originally posted by zhupeilei at 2013-06-09 08:03:28
我一般是按照梯度稀釋法10倍，100倍這樣稀釋的，最好是能一步稀釋到位，而且樣品和標(biāo)品應(yīng)該稀釋相同的倍數(shù)，否則誤差很大。吸光度不一定非要在0.2~0.8之間，0~1之間就很合理了。

我這樣問(wèn)不知道你能不能理解：標(biāo)線稀釋了10倍，得到的OD要乘以稀釋倍數(shù)就是10，才是原來(lái)標(biāo)線的OD，對(duì)吧，然后樣品要是也想稀釋同樣的倍數(shù)，得到的OD直接在標(biāo)線上找出對(duì)應(yīng)的含糖量，含糖量再乘以稀釋倍數(shù)是樣品正常應(yīng)該含有的糖量，是這樣做嗎？還是要樣品稀釋后得到的OD乘以稀釋倍數(shù)再在標(biāo)線上找出對(duì)應(yīng)的含糖量，這樣的話，結(jié)果肯定不在標(biāo)線所測(cè)的范圍內(nèi)啊

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6樓2013-06-09 09:36:06

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7樓: Originally posted by zhupeilei at 2013-06-09 12:04:16
我覺(jué)得不對(duì)。OD值是不應(yīng)該換算的，能換算的只能是濃度。你的稀釋只是把樣品濃度稀釋了，而不是OD值。我覺(jué)得應(yīng)該是這樣子的：首先，將標(biāo)線按10或者其他倍數(shù)濃度稀釋，稀釋之后的濃度是可以算出來(lái)吧，OD也是可以測(cè)出 ...

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8樓: Originally posted by Andyllk at 2013-06-09 14:17:05
假如你標(biāo)線稀釋10倍，樣品稀釋50倍的話，計(jì)算總糖時(shí)要乘于的稀釋倍數(shù)是(50/10=5)，即乘于5。盡量使吸光度落在0.2-0.8這樣精確些，所以你的標(biāo)線和樣品都要稀釋到0.2-0.8。但是稀釋倍數(shù)可以不一樣，到時(shí)候按上面的方法 ...

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