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monica_1436木蟲 (初入文壇)
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[求助]
Mix PCR和高保真PCR的條件，如何能調(diào)整？
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做酶切位點(diǎn)修飾PCR。 求教，MIX PCR時(shí)，條帶很亮，很清晰，而換了高保真PCR酶，就PCR不出來了，請部這是怎么了，要如何改條件才能PCR出來呀？ |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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monica_1436(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更詳細(xì)的解答。 2013-06-15 14:11:23
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monica_1436(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更詳細(xì)的解答。 2013-06-15 14:11:23
| 不同的酶的擴(kuò)增效率不同，你是否根據(jù)酶的特性而改變延伸時(shí)間？還有，不同酶對引物濃度、模板濃度的要求也不完全一樣，你需要根據(jù)酶的說明書混合體系及設(shè)置PCR程序。此外，如果模板不純的話對不同的酶的影響可能不一樣，如果不行的話，可以適當(dāng)增加鎂離子濃度或者調(diào)整退火溫度。 |
2樓2013-06-15 03:12:17
Fleaves
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3樓2013-06-15 04:56:14
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