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hxppxh木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
分析魚(yú)腸道細(xì)菌的種類-采樣和保存問(wèn)題 已有3人參與
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我大概要取2-300百條魚(yú)的腸道細(xì)菌。 （1）器具的處理問(wèn)題。我打算用一次性的刀柄和刀片解剖魚(yú)，但是鑷子和剪刀重復(fù)使用，每次使用后用75%的酒精處理可以嗎？有沒(méi)有更好的處理方法？ 采樣問(wèn)題： 很多文獻(xiàn)上說(shuō)先把腸道內(nèi)容物擠出來(lái)（取腸道細(xì)菌），然后用PBS或者鹽水洗3次（取腸壁細(xì)菌）。 （2) 請(qǐng)問(wèn)一般怎么洗腸壁？是把1條魚(yú)的腸分3次放到放3管溶液？ 樣品保存問(wèn)題 很多人說(shuō)保存在-20或者-80度。 我采樣在漁場(chǎng)采，那里有-20度冰箱。 (3) 在漁場(chǎng)采樣需要一周多的時(shí)間，從那里到實(shí)驗(yàn)室需要一天時(shí)間，我打算用95%酒精保存，不知道是否可行？ (4) 腸壁細(xì)菌如何采樣和保存呢？ DNA 提取。 我有幾百條魚(yú)，還沒(méi)有最后決定用多少條魚(yú)。提取方法打算用CTAB方法提取。 |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
laozuzunzhe: 金幣+4, good! 2013-06-23 21:53:52
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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| 這個(gè)好弄，首先你不必?fù)?dān)心污染，頂多放個(gè)酒精燈在旁邊就行。你把腸子取出后，兩端剪開(kāi)，用兩個(gè)鑷子擠到2或者1.5mlEP管中就行，因?yàn)槟c道中的菌很多，所以空氣中細(xì)菌基本忽略了，再加上旁邊有酒精燈，所以不必?fù)?dān)心污染。提DNA是試劑盒首選德國(guó)QIAGEN的糞便試劑盒（忘記貨號(hào)了），大約1500元，建議你把糞便弄到2ml管里（看說(shuō)明書(shū)就知道為什么了），保存的-20沒(méi)有任何問(wèn)題。 |
2樓2013-06-23 16:49:20
hxppxh
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3樓2013-06-24 00:30:34
4樓2013-06-24 09:15:29
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5樓2013-06-24 10:54:20
6樓2013-06-25 10:12:09
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7樓2013-06-26 11:03:22
8樓2013-06-27 09:42:40
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9樓2013-06-27 10:26:29
10樓2013-06-28 09:35:01
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