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hxppxh木蟲 (正式寫手)
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[交流]
分析魚腸道細(xì)菌的種類-采樣和保存問題 已有3人參與
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我大概要取2-300百條魚的腸道細(xì)菌。 (1)器具的處理問題。我打算用一次性的刀柄和刀片解剖魚,但是鑷子和剪刀重復(fù)使用,每次使用后用75%的酒精處理可以嗎?有沒有更好的處理方法? 采樣問題: 很多文獻(xiàn)上說先把腸道內(nèi)容物擠出來(取腸道細(xì)菌),然后用PBS或者鹽水洗3次(取腸壁細(xì)菌)。 (2) 請(qǐng)問一般怎么洗腸壁?是把1條魚的腸分3次放到放3管溶液? 樣品保存問題 很多人說保存在-20或者-80度。 我采樣在漁場(chǎng)采,那里有-20度冰箱。 (3) 在漁場(chǎng)采樣需要一周多的時(shí)間,從那里到實(shí)驗(yàn)室需要一天時(shí)間,我打算用95%酒精保存,不知道是否可行? (4) 腸壁細(xì)菌如何采樣和保存呢? DNA 提取。 我有幾百條魚,還沒有最后決定用多少條魚。提取方法打算用CTAB方法提取。 |

| 這個(gè)好弄,首先你不必?fù)?dān)心污染,頂多放個(gè)酒精燈在旁邊就行。你把腸子取出后,兩端剪開,用兩個(gè)鑷子擠到2或者1.5mlEP管中就行,因?yàn)槟c道中的菌很多,所以空氣中細(xì)菌基本忽略了,再加上旁邊有酒精燈,所以不必?fù)?dān)心污染。提DNA是試劑盒首選德國QIAGEN的糞便試劑盒(忘記貨號(hào)了),大約1500元,建議你把糞便弄到2ml管里(看說明書就知道為什么了),保存的-20沒有任何問題。 |

木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
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