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hia_25

鐵蟲 (小有名氣)

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[求助] SDS-PAGE電泳

大家好，請(qǐng)教一個(gè)問(wèn)題：最近做SDS-PAGE電泳，發(fā)現(xiàn)每次跑完膠，撬開薄板以后，膠的下端總是裙邊狀，就是比上端要寬很多，做western雜的小分子帶總是彎的，不知道怎么回事，很苦惱。分離膠的濃度是10%，80V或者90V恒壓跑全程，溴酚藍(lán)前沿出膠大約需要兩個(gè)半小時(shí)。開始懷疑是跑時(shí)間長(zhǎng)了，膠太熱變形了，后來(lái)冰浴跑，還是一樣。請(qǐng)各位資深高手指教��！

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1樓 2013-06-26 20:16:58

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青荷初想

銅蟲 (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

用薄板做western,圖一般會(huì)不好看，我們實(shí)驗(yàn)室一般都是用1.5mm的，圖還是不錯(cuò)的！

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5樓2013-06-27 16:20:16

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myprayer

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【答案】應(yīng)助回帖

★
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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-06-27 20:01:24
1949stone: 回帖置頂 2013-07-09 15:11:59

可能的原因
凝膠不均勻冷卻，中間冷卻不好
可能裝置不合適，凝膠和玻璃擋板底有bubble，或者倆遍聚合不完全

樣品溶解不好
樣品中含有不溶性顆粒
電極不平衡或者加樣位置偏了
加樣量過(guò)多

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hia_25

2樓2013-06-26 22:51:35

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【答案】應(yīng)助回帖

★
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-07-09 13:19:30

http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=3978670&fpage=1
還可以參考這個(gè)帖子

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3樓2013-06-26 22:54:37

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引用回帖:

5樓: Originally posted by 青荷初想 at 2013-06-27 16:20:16
用薄板做western,圖一般會(huì)不好看，我們實(shí)驗(yàn)室一般都是用1.5mm的，圖還是不錯(cuò)的！

嗯，我們一直都用1.0的，總是有這樣那樣的問(wèn)題，也不知道是不是這個(gè)膠板的問(wèn)題�？梢試L試一下，謝謝提醒

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6樓2013-07-01 10:07:55

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