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路二姐LEFT新蟲 (初入文壇)
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[求助]
緩沖溶液制備細(xì)節(jié)
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哪位大神給解釋一下下面兩個(gè)緩沖溶液的配制區(qū)別，到底是磷酸一氫鈉還是磷酸二氫鈉，還是磷酸鈉，還是磷酸，調(diào)pH用的啥， A PBS buffer ( 100 m M Na2HPO 4,0.3MNaCl, 5mMMgCl2, 1 mM EDTA, pH = 7 .4) was u sed for all DNA arrayfabrication. A p hosphate buffer ( 0.1 M NaCl, 10 m M sodium phosphate, p H = 7.4) was used f or DNA/DNA and DNA/RNA hybrid ization m easurements. |
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myprayer
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【答案】應(yīng)助回帖
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樓主，你說的是參考文獻(xiàn)里面的嗎？我們實(shí)驗(yàn)室一般都是這個(gè)樣子做的， 不知道對(duì)你有沒有幫助我先說下 PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)： 1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。 2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。 |
2樓2013-06-30 16:13:23
【答案】應(yīng)助回帖
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1949stone: MolEPI+1, 鼓勵(lì)分享經(jīng)驗(yàn) 2013-07-01 07:45:42
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在同一個(gè)pH 條件下，不管你加的是磷酸一氫鈉還是磷酸二氫鈉，還是磷酸鈉，還是磷酸，最終的離子形式都是一致的。一般而言，如果你用的是磷酸鹽，你用HCl調(diào)PH，只會(huì)有少量NaCl增加。如果你用磷酸二氫鈉,則用NaOH, 除了水不增加其他物質(zhì)。 事實(shí)上，雜交試驗(yàn)沒有那么敏感，不過第二 個(gè) 如果有EDTA的話，我會(huì)更喜歡 |
4樓2013-06-30 20:52:11
cicelyzh
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3樓2013-06-30 16:19:26
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