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路二姐LEFT新蟲 (初入文壇)
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[求助]
緩沖溶液制備細(xì)節(jié)
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哪位大神給解釋一下下面兩個(gè)緩沖溶液的配制區(qū)別,到底是磷酸一氫鈉還是磷酸二氫鈉,還是磷酸鈉,還是磷酸,調(diào)pH用的啥, A PBS buffer ( 100 m M Na2HPO 4,0.3MNaCl, 5mMMgCl2, 1 mM EDTA, pH = 7 .4) was u sed for all DNA arrayfabrication. A p hosphate buffer ( 0.1 M NaCl, 10 m M sodium phosphate, p H = 7.4) was used f or DNA/DNA and DNA/RNA hybrid ization m easurements. |
新蟲 (初入文壇)
專家顧問 (著名寫手)
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樓主,你說的是參考文獻(xiàn)里面的嗎?我們實(shí)驗(yàn)室一般都是這個(gè)樣子做的, 不知道對你有沒有幫助我先說下 PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制): 1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。 2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。 |
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在同一個(gè)pH 條件下,不管你加的是磷酸一氫鈉還是磷酸二氫鈉,還是磷酸鈉,還是磷酸,最終的離子形式都是一致的。一般而言,如果你用的是磷酸鹽,你用HCl調(diào)PH,只會(huì)有少量NaCl增加。如果你用磷酸二氫鈉,則用NaOH, 除了水不增加其他物質(zhì)。 事實(shí)上,雜交試驗(yàn)沒有那么敏感,不過第二 個(gè) 如果有EDTA的話,我會(huì)更喜歡 |

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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