 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 6384 | 回復(fù): 8 | ||
nnxqwei至尊木蟲 (職業(yè)作家)
|
[求助]
求助酶的Kcat 計(jì)算！
|
|
求助Kcat 計(jì)算！ 我用終濃度為100nM 純酶（分子量440ＫDa）對(duì)一類底物進(jìn)行動(dòng)力學(xué)測(cè)定，比活力為68Ｕ/mg, 通過(guò)雙曲線法得到底物的km值為0.2 mM, Vmax為40.22 mM/min，我用常用的公式計(jì)算酶對(duì)該底物的Kcat＝Vmax/[Ｅ]，結(jié)果好象不對(duì)�。�！搞了好長(zhǎng)時(shí)間，越來(lái)越糊涂了，請(qǐng)高手支招呀，謝謝！Kcat 應(yīng)該得多少呢，應(yīng)該如何計(jì)算呢？ [ Last edited by nnxqwei on 2013-7-3 at 15:30 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
321求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿天大材料與化工（085600）總分338
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
288求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料080500調(diào)劑求收留
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
294求調(diào)劑材料與化工專碩
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
332求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 關(guān)于土壤蔗糖酶活性的計(jì)算
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 如何計(jì)算一個(gè)酶促反應(yīng)的平衡常數(shù)？學(xué)生物的，不懂這個(gè)。
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 急需求解兩道生物化學(xué)工程的兩道計(jì)算題（monod方程及pH和酶濃度）
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 酶活力計(jì)算公式，求助啊
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 酶偶聯(lián)法測(cè)酶活力，怎么計(jì)算啊
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 關(guān)于酶用量的計(jì)算
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于比酶活的計(jì)算
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 計(jì)算引物退火溫度時(shí)末端加的酶切位點(diǎn)計(jì)算在內(nèi)嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 酶催化參數(shù) Km Vmax、 E和Mw知道后,怎么來(lái)計(jì)算Kcat??
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請(qǐng)教過(guò)氧化物酶活性POD計(jì)算方法
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)如何計(jì)算
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助】酶催化中TON（turnover number），TOF（turnover frequency）的計(jì)算方法
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】酶液稀釋倍數(shù)的計(jì)算
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教一個(gè)酶學(xué)計(jì)算題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【其他】酶的比活力計(jì)算
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助抗壞血酸過(guò)氧化物酶和谷胱甘肽還原酶活性的計(jì)算方法
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于纖維素酶ONOZUKA R-10的FPU計(jì)算
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】纖維素酶降解后糖化率如何計(jì)算
已經(jīng)有5人回復(fù)
水窮云起時(shí)
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 36
- 帖子: 8
- 在線: 2.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2531195
- 注冊(cè): 2013-07-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2013-07-04 11:47:09
qqxs
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 61 (初中生)
- 金幣: 3933.3
- 散金: 1003
- 紅花: 4
- 帖子: 337
- 在線: 40.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1108858
- 注冊(cè): 2010-09-27
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2013-07-04 12:38:00
nnxqwei
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 貴賓: 0.01
- 金幣: 44438.4
- 散金: 66
- 紅花: 110
- 帖子: 4688
- 在線: 781.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 50626
- 注冊(cè): 2004-07-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
4樓2013-07-04 19:17:35
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
137167741: 金幣+2, 小木蟲交流，共同進(jìn)步~~ 2013-07-06 14:00:12
nnxqwei: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-23 21:06:15
137167741: 金幣+2, 小木蟲交流，共同進(jìn)步~~ 2013-07-06 14:00:12
nnxqwei: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-23 21:06:15
|
以Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖最常用，測(cè)定和計(jì)算簡(jiǎn)便，也比較準(zhǔn)確。 將米-曼氏方程進(jìn)行倒數(shù)處理，得下列方程： 以1/V0為縱坐標(biāo)，1/[S]為橫坐標(biāo)作圖可得一直線�？v軸截距為1/Vmax，斜率為Km/Vmax，橫軸截距為-1/Km。舉例 1/V = 240.5 + 577.2 x 1/[S] ， Vmax is 1/240.5 = 0.00416 ， Km = 0.00416 x 577.2 = 2.40 。 ” 100nM 純酶（分子量440ＫDa）對(duì)一類底物進(jìn)行動(dòng)力學(xué)測(cè)定，比活力為68Ｕ/mg “，100nM*440000 (ng/L)=44000 000/1000 000 (mg/L)=44 （mg/L） ，計(jì)算得酶濃度時(shí)44mg/L 。 68U/mg*44mg/L=2992U/L=2.992u/ml ，計(jì)算得到比酶活是2.992u/ml，約3u/ml。不知道酶活是如何定義的，如果提供的信息、數(shù)據(jù)更多，更好確定。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
nnxqwei5樓2013-07-06 11:55:06
nnxqwei
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 貴賓: 0.01
- 金幣: 44438.4
- 散金: 66
- 紅花: 110
- 帖子: 4688
- 在線: 781.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 50626
- 注冊(cè): 2004-07-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
6樓2013-07-06 17:22:03
7樓2013-09-12 12:15:59
hl16010921
木蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 7
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 金幣: 2218.4
- 紅花: 8
- 帖子: 343
- 在線: 285.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2514830
- 注冊(cè): 2013-06-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nnxqwei: 金幣+10, ★★★很有幫助, 很有參考意義! 2013-09-21 16:37:42
nnxqwei: 金幣+10, ★★★很有幫助, 很有參考意義! 2013-09-21 16:37:42
|
Kcat是用Vmax算出來(lái)的，而Vmax顯然是外推得到的。而米氏方程完成的條件是在測(cè)定過(guò)程中底物濃度變化不大，在底物濃度太低時(shí)，由于底物的量少，變化率可能較大加上系統(tǒng)的波動(dòng)（導(dǎo)致不準(zhǔn)）而底物濃度太高，速度太快，導(dǎo)致初速度測(cè)不準(zhǔn)。這樣就使得有效數(shù)據(jù)受兩端數(shù)據(jù)影響很大。所以有時(shí)推出的Vmax顯得匪夷所思，其實(shí)是很正常的。 樓主的計(jì)算沒(méi)有問(wèn)題，不過(guò)0.1uM的酶濃度可能偏高，估計(jì)測(cè)得的Vmax可能偏低。。kcat可以用s-1表示422200/60=7036.666667s-1。kcat/Km=3,5183,333.33M-1* S-1.應(yīng)該在合理范圍。 |
8樓2013-09-13 11:13:17
9樓2015-09-09 22:03:10
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 nnxqwei 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩英一數(shù)二306 +5 | z1z2z3879 2026-03-18 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 司空. 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +3 | xbxudjdn 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | 小材化本科 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利，省、國(guó)級(jí)證書40+數(shù)一英一287 +8 | 小李0854 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +3 | 妮妮ninicgb 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +8 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | 孔志浩 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3 | 藥學(xué)chy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個(gè)專家，不知道名字 +3 | zk200107 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 255求調(diào)劑 +3 | 李嘉慧， 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | Mochaaaa 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過(guò) 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | 李政瑩 2026-03-12 | 3/150 |
|