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futurememory金蟲(chóng) (小有名氣)
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U251 細(xì)胞的MTT實(shí)驗(yàn)
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| U251細(xì)胞測(cè)定某藥物的IC50。96孔板，接種一天后給藥，2小時(shí)后，換培養(yǎng)基。換培養(yǎng)基的過(guò)程是用負(fù)壓吸取培養(yǎng)液，加入PBS，再負(fù)壓吸走，加入新培養(yǎng)基。問(wèn)題是每次加入PBS再負(fù)壓吸走后，中間的一大片細(xì)胞就沒(méi)有了，基本只剩下邊緣的一些細(xì)胞。感覺(jué)負(fù)壓吸取的時(shí)候已經(jīng)很小心了，不會(huì)碰到底部，但還是損失很多細(xì)胞。結(jié)果的誤差就非常大。本來(lái)以為是PBS有問(wèn)題，后來(lái)?yè)Q用移液器慢慢吸取PBS，情況好一些，但是這個(gè)操作就很麻煩。是因?yàn)樨?fù)壓吸取的力量太大導(dǎo)致細(xì)胞脫落嗎？ 請(qǐng)大家指點(diǎn)，謝謝！ |
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lqw12406
木蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2609.3
- 散金: 335
- 帖子: 45
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- 蟲(chóng)號(hào): 1277671
- 注冊(cè): 2011-04-25
- 專(zhuān)業(yè): 免疫生物學(xué)
| 樓主，您好，我前幾個(gè)月從公司買(mǎi)了一株人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞，當(dāng)時(shí)接收的時(shí)候很好，就連續(xù)養(yǎng)了幾代，凍存了2批，由于實(shí)驗(yàn)暫時(shí)沒(méi)有開(kāi)展，就把養(yǎng)著的細(xì)胞處理了，現(xiàn)在從液氮罐中復(fù)蘇該細(xì)胞，都沒(méi)有成活（2批都沒(méi)有），打電話給公司說(shuō)是凍存問(wèn)題（我以前的細(xì)胞凍存都是按照4℃，-80℃，液氮），需要付錢(qián)再購(gòu)買(mǎi)，但是不敢和老板講，現(xiàn)在要做實(shí)驗(yàn)了心急如焚，看樓主養(yǎng)U251細(xì)胞，您好心能否贈(zèng)送一株，或者交換也行，我這有Hep G2，Hep 3B，Smmc-7211，SW480，293T，A7r5，雪旺細(xì)胞等，非常感謝�。� |
2樓2014-05-16 14:10:29
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