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478156976木蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
miRNA qPCR內(nèi)參基因的選擇 已有12人參與
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我要做植物的miRNA的實(shí)時(shí)定量,之前實(shí)驗(yàn)室用的actin作為內(nèi)參,不過(guò)最近看到大家好像都用的U6什么的,actin不行么? [ Last edited by silicare on 2014-2-19 at 17:09 ] |
miRNA測(cè)序數(shù)據(jù)分析 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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請(qǐng)問(wèn)做逆轉(zhuǎn)錄獲取cDNA模板時(shí),目的miRNA和內(nèi)參U6的stemloop引物是加到同一個(gè)管子里進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,得到一管cDNA,還是目的miRNA和內(nèi)參U6的stemloop引物加到兩個(gè)不同的管子里進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,得到兩管cDNA呢?我現(xiàn)在是分別加到兩個(gè)管子里做逆轉(zhuǎn)錄,但一個(gè)師兄說(shuō)內(nèi)參要和目的基因用同一管cDNA模板。 我感覺(jué)我很難表述清楚我的問(wèn)題,我換個(gè)說(shuō)法,就是逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)獲得的cDNA模板是同一管,即同時(shí)含有目的miRNA和內(nèi)參U6的cDNA,還是在兩個(gè)管子里分別逆轉(zhuǎn)錄目的miRNA和內(nèi)參U6,得到兩管不同的cDNA呢? 非常謝謝師兄/師姐的解答! |
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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