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簫簫客銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
大分量蛋白的SDS-PAGE
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| 哪位大蝦做過蛋白分子量為160、190的SDS-PAGE。轉(zhuǎn)膜效率低，轉(zhuǎn)膜后用考馬斯亮藍(lán)染膠，大分量都沒轉(zhuǎn)下來。聽說可以在轉(zhuǎn)膜液里加SDS，那是加粉末的還是加液體的，轉(zhuǎn)的過程中蛋白會不會被SDS降解呢？誰做過大分子量的，幫幫忙啦 |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 回答很好，perfect 2013-07-10 09:15:37
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| 轉(zhuǎn)膜液里加SDS不是后加，是配制轉(zhuǎn)膜液時含有終濃度為0.0375%的SDS，用固體還是溶液隨便你。SDS不會降解蛋白，只是與蛋白結(jié)合，使其表面有足夠的負(fù)電荷。在電場力的作用下，可以提高遷移速度。簡單的說，就是讓蛋白在同樣的轉(zhuǎn)膜條件下轉(zhuǎn)得快一些。大蛋白一般不需要考慮是否會轉(zhuǎn)過，一般是增加轉(zhuǎn)膜時間就可以了。 |
2樓2013-07-10 01:19:35
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