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gg880712新蟲 (初入文壇)
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[求助]
電擊轉(zhuǎn)化各種不長，求助啊~~~
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做一種革蘭氏陰性細菌的電擊轉(zhuǎn)化，采用了2.2KV電壓，電擊時間在5ms左右，加NA培養(yǎng)基復(fù)蘇三小時后涂相應(yīng)抗性平板各種不長啊。。。 實驗室有一株和我做的菌同屬的細菌，用相同的轉(zhuǎn)化方法已經(jīng)很成熟了，效率很高，我這個是怎么回事啊。。。急啊，折騰了兩個月了。。。 [ Last edited by gg880712 on 2013-8-6 at 10:10 ] |
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2樓2013-08-06 10:21:46
gg880712
新蟲 (初入文壇)
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3樓2013-08-06 10:47:35
【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2013-08-23 18:00:08
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不了解SacB基因作用機理，建議LZ自己查找相關(guān)文獻， “sacB 基因編碼分泌型蔗糖果聚糖酶( levansucrase) , 該酶能催化蔗糖水解成葡萄糖和果糖,并且將果糖聚合成高分子量的果聚糖。但高分子量果聚糖積累對細胞存在潛在的毒性作用, 可造成細胞死亡。盡管枯草芽孢桿菌sacB 基因?qū)е略S多革蘭氏陰性菌( 如E. coli , Erwinia chrysanthemi, Legionella pneumophila) 和革蘭氏陽性菌( 如Corynebacteriu glutamicum ) 死亡的原理尚不清楚, 但將sacB 基因賦予細胞的蔗糖敏感特性作為一種陰性篩選克隆的標記, 在生物研究中特別是在基因克隆等遺傳操作中有著廣泛的應(yīng)用。” |
4樓2013-08-06 12:10:05
★
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-23 17:11:11
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5樓2013-08-23 16:26:13
gg880712
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6樓2013-08-29 15:10:04
7樓2015-05-10 09:31:41
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