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[交流]
我有一個關(guān)于無菌操作的疑問! 已有4人參與
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這半個月一直在做提細菌DNA,順便進行單菌落PCR的實驗。 我覺得很奇怪的就是如果我在挑取單菌落至液體培養(yǎng)基內(nèi)進行搖床培養(yǎng),我怎么才能證明我操作過程中未染雜菌,每次培養(yǎng)在小管子里,直接觀察起來差別好大,有的覺得整個液體渾濁度較為均勻,有的就是均勻,但是液體上面會有一層膜,還有的就是上面有一部分菌靠近液體上層,下面就還有部分菌沉淀,中間部分不怎么渾濁?傆X得是污染了醋酸桿菌。因為菌種為芽孢桿菌,試過進行芽孢染色鏡檢,效果卻很不理想,都是桿菌,而且桿狀有長有短,老師說在液體培養(yǎng)基的桿菌會有的長有的短,有的長的還可能是短的連一起了,而且只培養(yǎng)差不多15個小時左右,芽孢又不多,根本不能辨別是否染菌,如果染菌了,PCR的產(chǎn)物很可能有污染,拿去測序豈不就是雜菌的序列嗎?測序又貴,老師又是那種特別節(jié)約的人,真怕浪費他錢,結(jié)果測出來還是個錯的!等著挨罵啊! 而且現(xiàn)在老師讓我跟另外一個老師專門學技術(shù),可是那老師根本就不怎么教我啊,每次都讓我自己做,不懂問跟他做實驗的學生,自己慢慢摸索,出了結(jié)果再找他。結(jié)果出了結(jié)果找他,他讓我自己寄去上海,一個禮拜之后他告訴我,溫度太高沒測出來,讓我再做一次,我繼續(xù)做了然后問他要不要用冰袋什么的,他卻又說不用,那溫度不還是會很高啊,F(xiàn)在正在等著第二次的結(jié)果,多說都是淚! |
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