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這里面的退火是怎么操作的，謝謝
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. A single tile was used in each 6-helix bundle ystem. The strands of each tile were mixed stoichiometrically as estimated by OD260 and dissolved to 0.05−0.1 μM in either 1× TAE/ Mg2+buffer (40 mM Tris-HCl, 20 mM acetic acid, 2 mM EDTA, 12.5 mM magnesium acetate, pH 8.0) or in 1× HEPES-Na buffer (10 mM HEPES-Na, 11 mM magnesium chloride, 1 mM EDTA, pH 7.8).“ The solutions were annealed from 90 °C to room temperature over 48 h in a 2-L water bath insulated in a Styrofoam box”這步驟的實(shí)驗(yàn)需要用pcr操作退火嗎？謝謝 |
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| 用水浴鍋退火優(yōu)點(diǎn)是溫度變化速率慢，有助于充分退火，缺點(diǎn)是耗時長，在高溫時液體容易蒸發(fā)。我做過類似的退火操作，綜合比較下來還是用PCR儀好些，溫度變化速率是0.1度/s，半小時左右就結(jié)束了，而且不用擔(dān)心管蓋上有蒸發(fā)上來的液體。 |
3樓2013-08-08 15:36:33
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