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xianlu銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
上ODS開放柱如何操作
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歷經(jīng)3次硅膠柱上下來的一個餾分（合并了23管），量很多，極性較大（有一定的極性跨度），因硅膠板顯示正相再分離的話效果不理想，所以想上反相柱再分分，用的是自己裝的ODS開放柱，這里想請教： 1、上樣時直接將樣品混懸著上到柱體上面嗎？這樣的話我有2點(diǎn)擔(dān)心： （1）樣品中混有的洗脫不下來的成分（即不溶性成分，怎么洗脫也洗脫不下來，甚至是灰塵）最終會污染柱子。 （2）樣品有一定粘性，會堵塞柱子。 2、上樣時將樣品用甲醇溶解后再上樣嗎？這樣的話我有點(diǎn)擔(dān)心： （1）樣品難以用少量溶劑溶解（無論加熱、超聲等處理），所以樣液體積很大，極不利于分離。 因?yàn)闃悠返某煞謽O性還有一定跨度，ODS薄層板顯示有7-9個點(diǎn)，且樣品總量較多，我只是想通過此次ODS柱分離，將樣品進(jìn)一步砍段，有幸的話能拿到一兩個單體最好。但操作起來實(shí)在是讓我為難，真正請教各位，尤其是親自做過ODS開放柱的高手們能指點(diǎn)一二，內(nèi)心無比感激！ |
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xiaoxiao270: 金幣+1 2013-08-17 18:42:36
| 先點(diǎn)RP-TLC看看 100% MeOH,或者M(jìn)eCN 條件下原點(diǎn)有無殘留，有很多殘留，就得點(diǎn)4的膜過一下，再點(diǎn)板看看。如果殘留還是很多就不合適用反相了，如果沒有其它好的方法，你們實(shí)驗(yàn)室有錢的話也是可以上反相的，過完柱子以后把柱子上層部分扔掉，下面的可以接著用。 |
3樓2013-08-16 09:51:30
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