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xianlu銅蟲(chóng) (小有名氣)
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上ODS開(kāi)放柱如何操作
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歷經(jīng)3次硅膠柱上下來(lái)的一個(gè)餾分(合并了23管),量很多,極性較大(有一定的極性跨度),因硅膠板顯示正相再分離的話(huà)效果不理想,所以想上反相柱再分分,用的是自己裝的ODS開(kāi)放柱,這里想請(qǐng)教: 1、上樣時(shí)直接將樣品混懸著上到柱體上面嗎?這樣的話(huà)我有2點(diǎn)擔(dān)心: (1)樣品中混有的洗脫不下來(lái)的成分(即不溶性成分,怎么洗脫也洗脫不下來(lái),甚至是灰塵)最終會(huì)污染柱子。 (2)樣品有一定粘性,會(huì)堵塞柱子。 2、上樣時(shí)將樣品用甲醇溶解后再上樣嗎?這樣的話(huà)我有點(diǎn)擔(dān)心: (1)樣品難以用少量溶劑溶解(無(wú)論加熱、超聲等處理),所以樣液體積很大,極不利于分離。 因?yàn)闃悠返某煞謽O性還有一定跨度,ODS薄層板顯示有7-9個(gè)點(diǎn),且樣品總量較多,我只是想通過(guò)此次ODS柱分離,將樣品進(jìn)一步砍段,有幸的話(huà)能拿到一兩個(gè)單體最好。但操作起來(lái)實(shí)在是讓我為難,真正請(qǐng)教各位,尤其是親自做過(guò)ODS開(kāi)放柱的高手們能指點(diǎn)一二,內(nèi)心無(wú)比感激! |
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

金蟲(chóng) (小有名氣)
| 先點(diǎn)RP-TLC看看 100% MeOH,或者M(jìn)eCN 條件下原點(diǎn)有無(wú)殘留,有很多殘留,就得點(diǎn)4的膜過(guò)一下,再點(diǎn)板看看。如果殘留還是很多就不合適用反相了,如果沒(méi)有其它好的方法,你們實(shí)驗(yàn)室有錢(qián)的話(huà)也是可以上反相的,過(guò)完柱子以后把柱子上層部分扔掉,下面的可以接著用。 |
金蟲(chóng) (初入文壇)
銅蟲(chóng) (小有名氣)
銅蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (小有名氣)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
| 首先,ODS也就是所謂的C18反相柱,價(jià)格應(yīng)該不算便宜的,建議不要浪費(fèi)。上樣的話(huà)必然是溶液,不能夠是混懸液或者有固體不容物存在,可采用離心和過(guò)膜的方法去除不溶性成分;這時(shí)溶解樣品的溶劑應(yīng)該不能用純甲醇,不然的話(huà)部分樣品直接就被沖下來(lái)了,起不到分離的作用,要用甲醇水溶解樣品(至于比例要看你的流動(dòng)相是什么比例,最好和流動(dòng)相吻合,實(shí)在不行也不能相差太大)。如果樣品極性大的話(huà),用甲醇水應(yīng)該是可以溶得掉。 |

木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
金蟲(chóng) (初入文壇)
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