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loganfan銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
60-100L大腸桿菌發(fā)酵，剛開始涉及經(jīng)驗極度匱乏，乞求高手指導 已有2人參與
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| 培養(yǎng)了幾次，但結果都不太理想，主要是細菌密度不夠高，搞不清楚是培養(yǎng)基的問題還是控制的問題。 |
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 高密度發(fā)酵 |
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loganfan
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2樓2013-08-23 09:42:42
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loganfan
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6樓2013-08-27 15:48:07
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我們用的基礎培養(yǎng)基是改良的LB培養(yǎng)基，蛋白胨10g/L,酵母浸出粉10g/L，NaCl 5g/L，K2HPO4 5g/L，實罐滅菌后加入消泡劑（1ml/L）,MgCL2（2g/L）和T溶液（2ml/L）。 種子傳代方式為：單顆5ml中管培養(yǎng)過夜,傳至60mlLB中8小時，再傳至750mlLB中8小時，共6瓶（4500ml）接種至60L基礎培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)其實階段通過控制轉速來保證溶氧值保持在25以上，當轉速達到400rpm以上，通過通入壓縮空氣或純氧氣來保證溶氧。 培養(yǎng)伊始泵入1000ml 20%葡萄糖，隨后每一小時補加500ml20%葡萄糖，直至OD600值至10左右（約4h），不再補加葡萄糖，加6mM IPTG誘導，2h。收集菌體。 |
7樓2013-08-28 16:08:01
loganfan
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8樓2013-08-28 16:09:44
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10樓2014-06-24 23:12:59
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