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jiangcheng14金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
什么實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證一個(gè)蛋白對(duì)dna的nicking作用
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| 純化了一個(gè)蛋白,怎樣做實(shí)驗(yàn)看它有沒(méi)有對(duì)dna的nicking作用 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
專家顧問(wèn) (知名作家)
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我已經(jīng)想好了試驗(yàn)方法,有很多種。我需要樓主先回答一些問(wèn)題,以便對(duì)于試驗(yàn)方法有所選擇。 1.該蛋白質(zhì)的識(shí)別DNA雙鏈?zhǔn)欠裼幸阎腄NA的二級(jí)結(jié)構(gòu)或者一級(jí)結(jié)構(gòu)信息,或者是否有同源蛋白的識(shí)別DNA雙鏈?zhǔn)欠裼幸阎腄NA的二級(jí)結(jié)構(gòu)或者一級(jí)結(jié)構(gòu)信息作為參考? 2.目的蛋白質(zhì)的基因是否知道?或者是否有同源蛋白的基因已經(jīng)獲知? 3.目的蛋白質(zhì)切割某一段DNA的雙鏈序列的一條鏈上切出一個(gè)缺口是僅切割不連接?還是既切又連? 4.目的蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是否已知? 5.目的蛋白質(zhì)是否含有任何已知的輔基或者輔酶或者金屬離子? 6.目的蛋白質(zhì)在不切割一段DNA的雙鏈序列的一條鏈時(shí)是否與DNA非共價(jià)結(jié)合? 7.是否已知可能存在的目的蛋白質(zhì)的非共價(jià)結(jié)合的調(diào)控蛋白質(zhì)? 8.目的蛋白質(zhì)的細(xì)胞定位是否已知? 這些問(wèn)題實(shí)際上都可能包含在我提供的protocols中,如果樓主希望我提供的protocols有具體的參考價(jià)值,請(qǐng)回答以上問(wèn)題。對(duì)于以上問(wèn)題沒(méi)有答案也是一種的有效的答案,對(duì)于選擇protocols仍然是有幫助的。 |
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