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jiangcheng14金蟲 (小有名氣)
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[求助]
什么實驗可以驗證一個蛋白對dna的nicking作用
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| 純化了一個蛋白,怎樣做實驗看它有沒有對dna的nicking作用 |
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金蟲 (小有名氣)
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我已經(jīng)想好了試驗方法,有很多種。我需要樓主先回答一些問題,以便對于試驗方法有所選擇。 1.該蛋白質(zhì)的識別DNA雙鏈是否有已知的DNA的二級結(jié)構(gòu)或者一級結(jié)構(gòu)信息,或者是否有同源蛋白的識別DNA雙鏈是否有已知的DNA的二級結(jié)構(gòu)或者一級結(jié)構(gòu)信息作為參考? 2.目的蛋白質(zhì)的基因是否知道?或者是否有同源蛋白的基因已經(jīng)獲知? 3.目的蛋白質(zhì)切割某一段DNA的雙鏈序列的一條鏈上切出一個缺口是僅切割不連接?還是既切又連? 4.目的蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是否已知? 5.目的蛋白質(zhì)是否含有任何已知的輔基或者輔酶或者金屬離子? 6.目的蛋白質(zhì)在不切割一段DNA的雙鏈序列的一條鏈時是否與DNA非共價結(jié)合? 7.是否已知可能存在的目的蛋白質(zhì)的非共價結(jié)合的調(diào)控蛋白質(zhì)? 8.目的蛋白質(zhì)的細胞定位是否已知? 這些問題實際上都可能包含在我提供的protocols中,如果樓主希望我提供的protocols有具體的參考價值,請回答以上問題。對于以上問題沒有答案也是一種的有效的答案,對于選擇protocols仍然是有幫助的。 |
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