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greenygreen銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
MTT實(shí)驗(yàn)求助
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求助一個(gè)MTT實(shí)驗(yàn)問題: 我在最近的兩次實(shí)驗(yàn)中,都出現(xiàn)了空白組(只有細(xì)胞,不加藥組)根本不顯色的現(xiàn)象?瞻捉M和給藥組的操作都是一樣的: 96孔板,200ul 細(xì)胞懸液鋪板,貼壁90%的時(shí)候給藥; 包括調(diào)零組(只有培養(yǎng)基);空白組(細(xì)胞+DMSO);實(shí)驗(yàn)組(細(xì)胞+藥——三個(gè)藥物濃度); 37度孵育一小時(shí); 各孔加20ul (5mg/ml) MTT溶液,37度孵育4小時(shí)顯色; MTT用無菌PBS配制,0.22um濾膜過濾除菌。 4小時(shí)之后發(fā)現(xiàn)給藥組產(chǎn)生了藍(lán)色晶體,但是空白組完全沒有晶體產(chǎn)生。 顯微鏡下觀察空白組細(xì)胞生長情況較好,為啥不顯色呢。。! 站內(nèi)MTT的帖子雖然多,但是很多問題都沒有解決方法。以上的操作也都嚴(yán)格按照MTT檢測的操作進(jìn)行的。 求助大神! |
分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累 | 醫(yī)學(xué)相關(guān) |
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