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szasza鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
激光共聚焦觀察水稻穎果的亞細胞定位
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| 有人做過激光共聚焦觀察轉基因植物的GFP表達么,用的是穩(wěn)轉植株進行觀察,我想問一下上鏡觀察前的前處理步驟是什么?如何制片?能否長期保存?能否固定保存?謝謝! |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
| 固定可以,可以用Tris-Hcl buffer中加4%的多聚甲醛和0.5%的戊二醛(戊二醛的濃度我有點不太確定了,你可以查一下文獻),但你想長期保存不太可能,因為GFP的熒光會淬滅,你固定以后可以避光保存,至于能保存多長時間就跟你的材料有關了,像我們擬南芥的材料,一般也就保存一兩天熒光就不行了。另外保存的時候可以加點抗熒光淬滅劑或許可以效果好一點,但不要指望能保存很長時間。 |

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