 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1712 | 回復(fù): 4 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
qsx04152006木蟲 (知名作家)
|
[求助]
SOE-PCR
|
||
|
本人準(zhǔn)備將兩端基因連接在一起，一段長1620bp，，另一端長106bp，不知道用SOE-PCR能否將他們連接在一起。 1、107bp做pcr容易擴嗎，產(chǎn)生引物二聚體的話怎么回收？ 2、我的引物設(shè)計是否合適？重疊部分為20bp 基因1的序列：ATGGGGACAGTTAATAAACCTGTG.......CACTTCTACGATATGCCGCA 上游引物A：ATGGGGACAGTTAATAAACCTGTG（24bp） 下游引物B: GAATAAATTGACAATATTTG+TGCGGCATATCGTAGAAGTG 基因2的序列,106+TAA：CAAATATTGTCAATTTATTCTACAGTGGCGAGCTCCCTAGCACTGGCAATCATGGTAGCTGGTCTATCCTTATGGATGTGCTCCAATGGGTCGTTACAATGCAGAA+TAA（共109bp） 上游引物C：CACTTCTACGATATGCCGCA（20bp，基因1的3”端20bp序列）+ CAAATATTGTCAATTTATTC（基因2的5“端20bp） 下游引物D：TTATTCTGCATTGTAACGACCCATTG（26bp），其中用引物A和B擴增基因1，用引物C和D擴增基因2，然后用各自的PCR產(chǎn)物做模板，不加引物空延伸7個循環(huán)，再用引物A和D為引物，以上步空延伸的產(chǎn)物做模板，進(jìn)行PCR擴增，這樣是否可行？請大家指點，謝謝！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有194人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
chjinzhi
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 706.4
- 帖子: 584
- 在線: 237.5小時
- 蟲號: 1886329
- 注冊: 2012-07-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2013-09-04 21:02:39
qsx04152006: 金幣+5, ★有幫助, 能介紹一下touchdown-pcr嗎？ 2013-09-05 11:48:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2013-09-04 21:02:39
qsx04152006: 金幣+5, ★有幫助, 能介紹一下touchdown-pcr嗎？ 2013-09-05 11:48:02
|
1。107bp的片段還是容易擴增的。不是有膠回收嘛，怕啥引物二聚體呀！條帶大小又不一樣，實在不行，你提高瓊脂糖濃度唄，那樣分離更徹底一些。 2具體的還要看你用的酶，引物的退火溫度等，設(shè)計程序還要注意延伸的時間。如果嘗試了很多還是不行就利用touchdown-PCR試試吧。 |
4樓2013-09-04 17:34:41
qsx04152006
木蟲 (知名作家)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1906.8
- 散金: 4200
- 紅花: 10
- 帖子: 8713
- 在線: 305.6小時
- 蟲號: 335101
- 注冊: 2007-03-31
- 性別: GG
- 專業(yè): 疫苗學(xué)
2樓2013-09-04 11:13:28
chjinzhi
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 706.4
- 帖子: 584
- 在線: 237.5小時
- 蟲號: 1886329
- 注冊: 2012-07-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)
3樓2013-09-04 17:27:12
qsx04152006
木蟲 (知名作家)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1906.8
- 散金: 4200
- 紅花: 10
- 帖子: 8713
- 在線: 305.6小時
- 蟲號: 335101
- 注冊: 2007-03-31
- 性別: GG
- 專業(yè): 疫苗學(xué)
5樓2013-09-05 11:48:09
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +8 | 宋明欣 2026-03-27 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +14 | A child 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +6 | j的立方 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程找調(diào)劑 +16 | oatmealR 2026-03-29 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +21 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分 +6 | Shern—- 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +7 | Y-cap 2026-03-29 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +11 | 北道巷 2026-03-24 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 330分求調(diào)劑 +5 | qzenlc 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收 +9 | 天天好運來上岸?/a> 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +7 | 1428151015 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程，267求調(diào)劑 +16 | minht 2026-03-26 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +5 | 1428151015 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料考研求調(diào)劑 +3 | Dendel 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|