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wang24新蟲 (初入文壇)
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[求助]
驗(yàn)證miRNA靶基因
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| 請(qǐng)問一下，那個(gè)miRNA靶基因驗(yàn)證一般是用些什么方法，哪些操作起來(lái)方便些，我是剛?cè)胧值膶W(xué)生，謝謝大家了！ |
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2樓2013-09-05 16:15:03
Miss_M
銀蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-09-11 16:59:08
gyesang: 回帖置頂 2013-09-11 16:59:10
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gyesang: 回帖置頂 2013-09-11 16:59:10
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細(xì)胞內(nèi)加入miRNA會(huì)引起靶基因表達(dá)產(chǎn)物（蛋白質(zhì)）的變化 ，因此 可以從蛋白水平上驗(yàn)證靶基因是否被沉默了。常用的方法就是western blot. 當(dāng)然，也可以從靶基因mRNA水平驗(yàn)證，多用QPCR方法. 2樓說(shuō)的方法很直接，即在載體構(gòu)建中加入熒光素酶報(bào)告基因，報(bào)告miRNA是否產(chǎn)生。但是我認(rèn)為嘛，miRNA產(chǎn)生了未必就能沉默靶基因了，或者說(shuō)沉默的效率不高。所以還得看mRNA水平和蛋白水平的情況。 個(gè)人意見，僅供樓主參考。 |
3樓2013-09-11 16:45:19
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