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wang24新蟲 (初入文壇)
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[求助]
驗(yàn)證miRNA靶基因
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| 請(qǐng)問一下,那個(gè)miRNA靶基因驗(yàn)證一般是用些什么方法,哪些操作起來方便些,我是剛?cè)胧值膶W(xué)生,謝謝大家了! |

銀蟲 (初入文壇)
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細(xì)胞內(nèi)加入miRNA會(huì)引起靶基因表達(dá)產(chǎn)物(蛋白質(zhì))的變化 ,因此 可以從蛋白水平上驗(yàn)證靶基因是否被沉默了。常用的方法就是western blot. 當(dāng)然,也可以從靶基因mRNA水平驗(yàn)證,多用QPCR方法. 2樓說的方法很直接,即在載體構(gòu)建中加入熒光素酶報(bào)告基因,報(bào)告miRNA是否產(chǎn)生。但是我認(rèn)為嘛,miRNA產(chǎn)生了未必就能沉默靶基因了,或者說沉默的效率不高。所以還得看mRNA水平和蛋白水平的情況。 個(gè)人意見,僅供樓主參考。 |
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