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yinjuanchen鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)溶劑比例
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Q1：如題，用質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)，ESI源，在保證蛋白質(zhì)不變性的前提下，有經(jīng)驗(yàn)的前輩推薦下溶劑甲醇和水的比例。（我用1:1的比例，發(fā)生的嚴(yán)重的變性，只用水作溶劑，由于儀器本身的限制，電離電壓最大為5500V，不能電離） Q2:通過質(zhì)譜圖的電荷分布，為何可以知道溶液中蛋白質(zhì)存在幾種構(gòu)象？（構(gòu)象不同，所帶電荷不同，但怎么區(qū)分不同的構(gòu)象，譜圖有什么特征？） 謝謝！ [ 來自小組 Ocean家族 ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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yinjuanchen: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝！ 2013-09-26 08:08:58
yinjuanchen: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝！ 2013-09-26 08:08:58
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Q2 簡單來說，蛋白的構(gòu)象越團(tuán)簇，或者說縮成一團(tuán)，那么它暴露在外面的可被質(zhì)子化的個數(shù) 或者說戴電荷的個數(shù)會越少。 越緊縮的構(gòu)象，所帶電荷越少，那么蛋白在m/z較大區(qū)域的分布信號就會越強(qiáng)。 質(zhì)譜圖上，蛋白相關(guān)的多電荷峰會往m/z大的區(qū)域偏移。 加強(qiáng)酸denature后，m/z信號往小的區(qū)域偏移。 同一溶液中，蛋白同時存在幾種構(gòu)象，并且具體如何區(qū)分這幾種構(gòu)象，我就不太清楚了。 |
7樓2013-09-25 11:03:53
chenzhengyi
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2樓2013-09-06 11:39:43
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3樓2013-09-06 19:48:22
4樓2013-09-06 22:14:35
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