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axiong8702新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于液質(zhì)檢測(cè)藥物濃度的問(wèn)題
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| 我想檢測(cè)動(dòng)物組織臟器藥物分布濃度,請(qǐng)教一下,各臟器進(jìn)液質(zhì)之前的前處理是否相同?具體該如何操作? |
藥代分布 |
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
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專家經(jīng)驗(yàn): +2 |
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)
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各組織器官取出后,進(jìn)行組織勻漿,之后可以選擇高速離心,取上清,用甲醇或乙腈充分沉淀蛋白后再次離心,取上清,過(guò)濾進(jìn)質(zhì)譜分析就可以了。 各組織器官的處理方法盡量相同,以比較藥物在不同組織中的分布情況。 這個(gè)方法供你參考,看看是否會(huì)有幫助。 |
木蟲(chóng) (正式寫手)
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1、質(zhì)譜電離需要注意的一些要點(diǎn): 不知道你所要分析的物質(zhì)的性質(zhì)及電離的方式如何?如果電離效率不太好,可以加點(diǎn)兒甲醇(利于之子轉(zhuǎn)移),還有你的溶液中也可以加入一點(diǎn)揮發(fā)性的陽(yáng)離子、陰離子鹽利于電離! 質(zhì)譜定量,分辨率高,除經(jīng)典電離外質(zhì)譜定量的重現(xiàn)性低,但是如果你用ESI電離話,可以教你一個(gè)既可以保證分辨率,也可以保證重現(xiàn)性,可以用內(nèi)標(biāo)法,根據(jù)峰面積的比例進(jìn)行定量,R2可以達(dá)到0.99. 2、樣品前處理 制備樣品時(shí),可以用勻漿劑(甲醇或者乙腈,NaOH和緩沖液等)勻漿,離心,沉淀,得到前處理樣品。此種獲得的上清液中還可以進(jìn)一步(或者在勻漿時(shí)同時(shí)萃取)萃取所要分離的物質(zhì),上面所用到方法就為蛋白沉淀法和液液萃取法。若果這樣所得到前處理樣品干擾物質(zhì)效果不好(還有蛋白質(zhì)、磷脂等),前處理樣品再用SPE(但此種方法回收率比較低),一般可以達(dá)到有不錯(cuò)的效果。之后揮干所得到的前處理樣品,用流動(dòng)相復(fù)溶樣品,上樣! |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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