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高手請進--金黃色葡萄球菌的electroporation問題
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各位蟲友們, 目前這個問題已經(jīng)困惑我了將近半年的時間,真心的懇請蟲友們幫幫我。 為了做一個臨床株的mutant strain, 我需要將一個重組的plasmid通過electroporation導(dǎo)入到這個金黃色葡萄球菌中。已經(jīng)幾乎確定過了所有步驟沒有弄錯--先酶切質(zhì)粒和target DNA--進行l(wèi)igation之后--tansformation到E.coli(DH5a)--electroporation到RN4220--細菌正常長出--再提質(zhì)粒--electroporation到這個臨床株的competent cells-------------什么也沒長出來(大概做了幾十次,從檢查competent cells到重組plasmid測序及PCR確認等等)。! 真心著急,pasmid進不去,就做不了mutant strain,實驗就不能繼續(xù)往下進行。希望蟲友們能給出一些指點,建議,和一些相關(guān)資料能供我學(xué)習(xí)。在此,先謝過了!! ![]() |


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