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CHO細(xì)胞G418篩選濃度的確定 已有1人參與
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| 看到不少地方說(shuō)CHO的G418篩選濃度為700-800 μg/ml,確定篩選濃度時(shí)需要找出10到14天內(nèi)殺死細(xì)胞的G418濃度,并以高一級(jí)的濃度作為篩選濃度,我做這個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí)拉的梯度是500-1200 μg/ml,但是14天過(guò)去了,高濃度的孔依然有細(xì)胞存活,所以很疑惑是G418濃度不夠高嗎還是G418本身就不能完完全玩殺死全部的細(xì)胞?另外我同時(shí)做了另外一個(gè)鋪板1天半加G418培養(yǎng)的板,細(xì)胞存活量明顯多于鋪板1天的,這是不是意味著G418的作用與細(xì)胞濃度有關(guān)?大家做的時(shí)候有這樣的情況出現(xiàn)嗎?求大俠們圍觀解惑。。 |
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1.CHO細(xì)胞G418篩選的濃度,在分析克隆中肯定是給出了。 2.不同商家的G418,由于純度不同,藥效是有差異的。 3.另外,配制G418母液時(shí),濃度一定配制準(zhǔn)確。能否說(shuō)說(shuō)你的G418的配制過(guò)程? 4.G418篩選時(shí),細(xì)胞密度20-30-40%,甚至10%開始?xì),絕對(duì)不要超過(guò)50%。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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