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[求助]
CHO細(xì)胞G418篩選濃度的確定 已有1人參與
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| 看到不少地方說CHO的G418篩選濃度為700-800 μg/ml，確定篩選濃度時需要找出10到14天內(nèi)殺死細(xì)胞的G418濃度，并以高一級的濃度作為篩選濃度，我做這個實(shí)驗(yàn)時拉的梯度是500-1200 μg/ml，但是14天過去了，高濃度的孔依然有細(xì)胞存活，所以很疑惑是G418濃度不夠高嗎還是G418本身就不能完完全玩殺死全部的細(xì)胞？另外我同時做了另外一個鋪板1天半加G418培養(yǎng)的板，細(xì)胞存活量明顯多于鋪板1天的，這是不是意味著G418的作用與細(xì)胞濃度有關(guān)？大家做的時候有這樣的情況出現(xiàn)嗎？求大俠們圍觀解惑�。�！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-16 20:50:38
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1.CHO細(xì)胞G418篩選的濃度，在分析克隆中肯定是給出了。 2.不同商家的G418，由于純度不同，藥效是有差異的。 3.另外，配制G418母液時，濃度一定配制準(zhǔn)確。能否說說你的G418的配制過程？ 4.G418篩選時，細(xì)胞密度20-30-40％，甚至10％開始?xì)�，絕對不要超過50％。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
4樓2013-09-16 19:11:02
2樓2013-09-16 13:18:01
3樓2013-09-16 16:55:07
5樓2013-09-17 13:21:02
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