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小墨825新蟲 (小有名氣)
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[求助]
Triton X-114法提取膜蛋白
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| 利用Triton X-114法分層得到膜蛋白(下層),怎么把Triton X-114去除?有沒有可能將膜蛋白轉移到水相?衷心求助! |
分子生化實驗經(jīng)驗積累 | 蛋白質生物學實驗經(jīng)驗 |
木蟲 (小有名氣)
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對不起,我不太了解你的課題以及實驗步驟,我能提供的幫助有限,只說一些個人想法,希望對你有用。 1. 我認為表面活性劑是一頭親水,一頭疏水的,那么他與水溶液互溶時,我覺得有兩種情況,要么油包水,要么水包油,我覺得分層的現(xiàn)象,應該不是去垢劑的原因,我覺得去垢劑與水是互溶的。不好意思,了解甚少。分層這點希望你能教我。 2. 你說之前過柱都不去除去垢劑,是因為濃度低。我覺得高濃度的表面活性劑能使蛋白質變性,盡管是非離子型的。濃度低一點能提取出來嗎?我覺得幾個CMC的濃度就應該可以了。 3. 換成另一種表面活性劑是可以的,但是選哪一種表面活性劑是難點。我覺得一般用一種便宜的去垢劑提取,后期換成需要的去垢劑。 互相學習,分層的現(xiàn)象麻煩你教我,你們實驗室其他的也分層嗎? |
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