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yangjianchen銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
尋找未知功能蛋白的互作蛋白
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| 得到一個(gè)未知功能的蛋白后，通過什么辦法可以在在總蛋白中找到與它相互作用的蛋白呢？免疫共沉淀or WB，還是其它？ |
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 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | 結(jié)構(gòu)生物學(xué) |
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凌波麗
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yangjianchen: 金幣+10, ★★★★★最佳答案, 非常感謝。應(yīng)該是拿現(xiàn)有蛋白做抗體探針，在總蛋白中去尋找互作蛋白 2013-09-20 15:45:47
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-09-20 19:59:09
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所有的研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的方法都已用到，MS，NMR，酵母雙雜交，WB，能量轉(zhuǎn)移，免疫共沉淀，熒光量子點(diǎn)，低溫冷凍電鏡，原子力顯微鏡。 考慮到是從總蛋白質(zhì)里鑒定和提取出與已知蛋白質(zhì)相互作用的未知蛋白質(zhì)，則用免疫共沉淀、 WB和Pull down比較好。 |
2樓2013-09-20 15:20:52
凌波麗
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-09-20 19:59:16
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-09-20 19:59:16
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總體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可參考： http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=6319950 的18樓和33樓，把多肽-蛋白質(zhì)相互作用改為蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。 |
3樓2013-09-20 15:25:00
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