| 17 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2939 | 回復(fù): 16 | |||
[交流]
大腸桿菌中beta-半乳糖苷酶的困惑
|
|||
|
小弟是學(xué)材料的,對微生物這塊一竅不通,但老師要求我做微生物傳感器,我也只能硬著頭皮做了。 最近有個想法,通過顏色的變化來反應(yīng)金屬離子的毒性。無意中看到有人用ONPG來檢測beta-半乳糖苷酶的活性,并且文獻(xiàn)上說對大腸桿菌而言beta-半乳糖苷酶是胞內(nèi)酶。然后設(shè)想:金屬離子能改變大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性,通透性的改變能使細(xì)胞內(nèi)的beta-半乳糖苷酶釋放到細(xì)胞外。而beta-半乳糖苷酶可以催化水解ONPG,生成黃色的物質(zhì),該黃色物質(zhì)在波長420nm處存在特征吸收峰。那么根據(jù)顏色的深淺及峰的強度就能判斷出金屬離子對大腸桿菌的毒性。 為了使大腸桿菌產(chǎn)生beta-半乳糖苷酶,我在培養(yǎng)基中加入乳糖。培養(yǎng)后,用0.8%的NaCl溶液清洗離心分離,最后將細(xì)菌沉淀分散到PBS溶液中。但令人尷尬的是,即使在不存在金屬離子的情況下,往菌液中加入ONPG,就可以觀察到明顯的黃色變化,并且在波長420nm處可以觀察到水解產(chǎn)物的特征吸收峰。 因此很困惑:beta-半乳糖苷酶是胞內(nèi)酶還是胞外酶?是不是有的大腸桿菌中beta-半乳糖苷酶是胞內(nèi)的,而有的則是胞外的?該如何理解胞內(nèi)酶和胞外酶? |
» 搶金幣啦!回帖就可以得到:
+5/415
+1/289
+1/87
+1/80
+1/76
+1/68
+1/55
+1/37
+1/35
+1/30
+1/11
+1/8
+1/8
+1/7
+1/5
+1/5
+1/4
+1/2
+1/2
+1/2
關(guān)于這個問題,我回到了好幾次了,![]() 學(xué)過生化的都知道乳糖操縱子,可能僅僅是應(yīng)付考試而已,學(xué)過就忘了。 beta-半乳糖苷酶實際上還需要另外兩個酶組成beta-半乳糖苷酶轉(zhuǎn)運體系。 這體系中有一個通透酶,可以將底物從胞外轉(zhuǎn)運到胞內(nèi)。 即使沒有這個轉(zhuǎn)運過程,一些現(xiàn)在未知的機制也可能是屬于胞內(nèi)酶同樣表達(dá)出胞外酶的活性。 所以,你的改變膜通透性的思路是不合適的。 [ Last edited by mizhoulong on 2013-9-26 at 14:48 ] |
| 17 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸! 2026-03-16 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +5 | 梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +8 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
[考研] 085601材料工程專碩求調(diào)劑 +6 | 慕寒mio 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
[考研] 331求調(diào)劑(0703有機化學(xué) +7 | ZY-05 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)336分求調(diào)劑 +6 | zbzihdhd 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑,一志愿985 +4 | 張vvvv 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林,給自己招師弟中~ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(xué)(華東)305分求調(diào)劑 +3 | 嘉年新程 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
[考研] 招收0805(材料)調(diào)劑 +3 | 18595523086 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | Mochaaaa 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 085600英一數(shù)二總分302 前三科235 精通機器學(xué)習(xí) 一志愿哈工大 +4 | 林yaxin 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ADT 2026-03-12 | 7/350 |
|