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一葦杭之xmc銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助，sds-page跑膠都糊成一片了，~~o(>_<)o ~~
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從左到右是maker，樣品a，樣品b。a和b分別是微生物蛋白和蚯蚓蛋白，提取方法不一樣，主要是裂解液成分不一樣。maker跑的沒問題，應(yīng)該不是膠制作問題吧。b樣品基本上也還可以，但是顯然被a影響到了的。我懷疑是不是a樣品裂解液中的成分有問題啊，以至于溶解了膠？a確實是濃度有點小，但依稀沒糊的地方還可以看到一點點條帶的，但是越跑越彌散，最后就這樣了。。。桑心 我是半路出家弄分子生物的，初次接觸蛋白，還望各位有經(jīng)驗的蟲子指點，謝謝！ DSC_0568.jpg [ Last edited by 一葦杭之xmc on 2013-9-27 at 20:59 ] |
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 蛋白質(zhì)生物學(xué)實驗經(jīng)驗 |
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凌波麗
專家顧問 (知名作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+2, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待更詳細(xì)的解答 2013-09-28 13:19:15
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myprayer: 金幣+2, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待更詳細(xì)的解答 2013-09-28 13:19:15
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可能原因與解決： 1.蛋白質(zhì)發(fā)生了降解。處理辦法：重新提取蛋白質(zhì)，加入蛋白酶抑制劑。 2.樣品濃縮效果不好。處理辦法：樣品上樣前煮沸充分，適當(dāng)增加濃縮膠的長度;保證濃縮膠貯液的pH正確(6.7)，適當(dāng)降低電壓。一般電泳均按這種方式處理，樣品稀釋適當(dāng)濃度，加入上樣Buffer，離心，沸水煮5min，再離心加樣。 3.拖尾嚴(yán)重，樣品溶解解效果不佳或分離膠濃度過大引起的。 處理辦法：加樣前離心；選擇適當(dāng)?shù)臉悠肪彌_液，加適量樣品促溶劑（比如表面活性劑）；電泳緩沖液時間過長，重新配制；降低凝膠濃度。 僅供參考！ |
3樓2013-09-28 11:11:47
zhangbighui
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一葦杭之xmc
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4樓2013-09-29 14:27:03
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5樓2013-09-29 14:28:30
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