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yinyin1988木蟲 (小有名氣)
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[交流]
液相色譜 流動相的問題 已有2人參與
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| 查了一下高效液相色譜常用的流動相為甲醇-水和乙腈-水，很多人說樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液最好用流動相來配制，但是很多有機物都不溶于甲醇-水和乙腈-水體系或溶解不完全（不均勻或不成均相吧），是否說明樣品溶液可以不用流動相來配制啊，如果是，那是不是用流動相中的有機相（甲醇或乙腈）來配制會比其他溶劑要好些啊 |
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tianxia119wo
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6樓2013-10-02 11:31:37
tianxia119wo
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樓主你好，目前hplc分析多為反相色譜，流動相多為甲醇、乙腈、水，加各種添加劑以改善分離性能。樣品一般用與流動相相溶的溶劑溶解。最佳的溶解方法是用流動相溶解，但是很多情況是不一致的。當(dāng)用溶劑極性強度大的試劑，如純甲醇、純乙腈，純乙醇，而分析體系中以水為主，樣品進樣量大，如定量管為20ul，此條件下完全可以肯定，單一的純物質(zhì)出雙峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一樣），且拖尾，保留時間會提前(相對進樣量少而言)，將進樣量減少一半以上，峰型將變?yōu)檎�。這是樣品的溶劑與流動相極性相差太大，而流動相來不及將其稀釋達到平衡造成的。上面提到進樣量造成雙峰的一個原因，另一個原因是，進樣量不一定大，但絕對量很大，色譜圖上的雙峰緊靠在一起，基本上齊高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色譜柱問題）。將樣品稀釋再進樣就可以了，這是由于進樣量過大，色譜柱過載造成的。 稀釋劑如果不能跟流動相保持一致，即稀釋劑不能完全溶解樣品時，我自己通常會加入其中的有機相也就是甲醇或者乙腈來輔助溶解，液相樣品超聲溶解也是很普遍的。假如樣品依舊不溶解，我自己通常選擇過濾，然后走樣。認(rèn)為假如調(diào)整有機相比例后仍不能溶解，假如加入異丙醇之類溶劑輔助溶解，遇到流動相后有可能析出樣品，造成柱子堵塞，得不償失的。樣品過濾后依然較為渾濁，需要再過濾，還不行就只好放棄進樣了。 |
2樓2013-10-01 14:46:36
tianxia119wo
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3樓2013-10-01 14:48:12
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4樓2013-10-01 14:50:30
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