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yuer_新蟲 (初入文壇)
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[求助]
真菌發(fā)酵液離心后無(wú)法過(guò)膜 怎么辦
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真菌發(fā)酵液離心后無(wú)法過(guò)膜 怎么辦?我做的是真菌的發(fā)酵,目標(biāo)產(chǎn)物是直接分泌胞外的,查了相關(guān)文獻(xiàn)也是離心后過(guò)0.45的膜后直接上的液相。 但是,我的發(fā)酵液十分黏稠 10000rpm離心15min后還是過(guò)不了膜,甚至稀釋10倍后阻力還是很大。試過(guò)加乙醇、甲醇沉淀 蛋白多糖,但是處理后產(chǎn)物基本就檢測(cè)不到了。求助各位大俠啊。。 |
鐵蟲 (初入文壇)

鐵桿木蟲 (著名寫手)
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亂碼,已編輯。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] [ Last edited by laozuzunzhe on 2013-10-6 at 22:09 ] |
木蟲 (著名寫手)
| 我分離過(guò)真菌胞外產(chǎn)物,用的方法與你不同,你是直接對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行測(cè)定,我是將產(chǎn)物提取出來(lái)在進(jìn)行分析,過(guò)程是這樣的:發(fā)酵液加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至12.5,超聲3min,10000 rpm高速離心,上清液用冰乙醇4攝氏度沉淀12h,底部沉淀物即為胞外產(chǎn)物,5000 rpm離心獲得產(chǎn)物,凍干后保存干燥樣品用于后續(xù)分析。不知對(duì)于你的菌株適用不適用。 |
至尊木蟲 (著名寫手)
美女搞科研
| 你做的跟我做的基本一樣,不同的是,我真菌發(fā)酵液都是120L,也是分離次級(jí)代謝產(chǎn)物,你的我估計(jì)是試管級(jí)吧,(因?yàn)槭俏⑸锇鍓K ,呵呵)看你的實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)產(chǎn)物不是很明確, 我們的方法就是用乙酸乙酯與發(fā)酵液等體積萃取三次,將你的目標(biāo)產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯相里去,這樣你就很容易將乙酸乙酯旋蒸蒸干,然后用甲醇或者乙腈溶解,然后過(guò)膜上液相唄。。。。多糖 蛋白質(zhì)等大極性物質(zhì)是不會(huì)萃取到有機(jī)相里的,希望可以幫到你。。。。。。。。。。。。。。。。。。 |
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