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雷煥銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
未知化合物用高效液相怎么樣確定色譜條件?
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| 我現(xiàn)在分離出化合物想上液相看看,但是色譜條件怎么設(shè)置呢?如果是做整個石油醚萃取層又怎么確定色譜條件呢?求各位學(xué)者能夠給予幫助!謝謝! |

金蟲 (小有名氣)
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首先,石油醚萃取層一般而言是極性比較低的成分,對于未知物質(zhì)最好用梯度;由于是石油醚萃取層,因此,建議梯度從50% ACN開始至95% ACN; 其次,你要確定你的化合物有沒有紫外吸收,好確定檢測波長;如果無法確定,可以用DAD檢測器,做全波長掃描190-600nm(或-400nm); 最后,通過以上的初步結(jié)果,做進一步的優(yōu)化 |
木蟲 (正式寫手)
致良知,知行合一
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首先確定波長,做個全波長掃描,選取所有成分吸收值均比較大的波長作為檢測波長; 其次定色譜條件,根據(jù)樣品極性選擇正相或反相色譜。 然后根據(jù)樣品信息篩選色譜柱、流動相(pH、有機相水相比例、加不加緩沖鹽、加不加調(diào)節(jié)劑)、柱溫、流動相梯度條件等等。 建立方法的路很長,多查文獻,借取經(jīng)驗,可以少走彎路。 |

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