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雷煥銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
未知化合物用高效液相怎么樣確定色譜條件？
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| 我現(xiàn)在分離出化合物想上液相看看，但是色譜條件怎么設(shè)置呢？如果是做整個石油醚萃取層又怎么確定色譜條件呢？求各位學者能夠給予幫助！謝謝！ |
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fgy20045832
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
雷煥: 金幣+3, ★★★很有幫助, 謝謝！ 2013-10-07 16:52:53
xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝 2013-10-07 20:40:41
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xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝 2013-10-07 20:40:41
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首先確定波長，做個全波長掃描，選取所有成分吸收值均比較大的波長作為檢測波長； 其次定色譜條件，根據(jù)樣品極性選擇正相或反相色譜。 然后根據(jù)樣品信息篩選色譜柱、流動相（pH、有機相水相比例、加不加緩沖鹽、加不加調(diào)節(jié)劑）、柱溫、流動相梯度條件等等。 建立方法的路很長，多查文獻，借取經(jīng)驗，可以少走彎路。 |
4樓2013-10-07 16:46:58
2樓2013-10-06 23:58:17
浪子燕青
金蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
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xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝 2013-10-07 20:40:34
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xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝 2013-10-07 20:40:34
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首先，石油醚萃取層一般而言是極性比較低的成分，對于未知物質(zhì)最好用梯度；由于是石油醚萃取層，因此，建議梯度從50% ACN開始至95% ACN； 其次，你要確定你的化合物有沒有紫外吸收，好確定檢測波長；如果無法確定，可以用DAD檢測器，做全波長掃描190-600nm（或-400nm）； 最后，通過以上的初步結(jié)果，做進一步的優(yōu)化 |
3樓2013-10-07 14:08:47
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