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doubleping新蟲 (小有名氣)
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[求助]
DGGE銀染問題 已有1人參與
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| 我的DGGE膠用銀染方法染色,背景很干凈,但是泳道顏色很深,有什么方法可以讓用淡顏色淡點嗎? |
新蟲 (小有名氣)
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試劑配方 10% HAC 50ml HAC(冰醋酸)+450ml dH2O 1%硝酸 5ml 硝酸+495ml dH2O 0.2%硝酸銀 1g硝酸銀+500ml dH2O+500ul甲醛 2.5%碳酸鈉 12.5g碳酸鈉+250ul甲醛+500ml dH2O 步驟 a、小心將膠卸下,留在大板上 b、放入500ml 10%乙酸中搖晃20min固定 c、小心將膠取出,將盆洗凈 d、放入500ml 1%硝酸溶液中搖晃固定10分鐘 e、500ml蒸餾水洗三次,搖晃 f、加入500ml 0.2%硝酸銀溶液,溫室中黑暗搖晃20-30分鐘 g、取出膠用500ml蒸餾水洗滌10秒 h、加入2.5%預冷的碳酸鈉溶液搖晃條帶顯出 i、用蒸餾水清洗,拍照 備注: e步驟第二次水洗一定要超過5分鐘,這樣膠不易碎,其他兩次隨意 g步驟,先用水洗一次,10s 把水倒掉,在洗一次,15-20s,這樣背景就不會很黑 |
金蟲 (正式寫手)
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