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黑曲霉轉化,表達質粒線性化位點選擇
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| 表達質粒,marker質粒共轉染黑曲霉,方法是PEG介導的原生質體轉化,目前用2個完整質粒(未線性化)共轉化能得到轉化子,但是轉化子只能P出目的基因不能P出marker基因,所以打算用2個質粒的線性化狀態(tài)轉化,但是不知道如何選擇線性化位點?表達質粒表達框是:黑曲霉糖化酶啟動子——目的基因——終止子,連在PUC19的MCS上 marker質粒表達框是:構巢曲霉GPD啟動子——黑曲霉pyrG基因——終止子,就是質粒pAN7-1的hph基因替換了我的pyrG基因,我就是問 我的線性化位點應該選擇哪邊? |
新蟲 (正式寫手)
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