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[交流]
畢赤表達(dá)一酶基因，跑蛋白電泳只有一條帶，是不是不用純化了呀 已有6人參與
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| 各位大俠，我用畢赤GS115表達(dá)一酶基因，跑SDS-PAGE，只有一條帶，但是帶比較粗，有點(diǎn)兒彌散，這樣能不能說明蛋白是單一的，可以不做純化了嗎？可以直接做后面的酶學(xué)性質(zhì)嗎 |
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2樓2012-08-08 21:42:46
awvc
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小丹木木: 金幣+3, 很有道理 2012-08-09 14:13:45
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理論上GS115的胞外分泌蛋白，（還要考慮你用哪種載體轉(zhuǎn)入的），僅有你轉(zhuǎn)入質(zhì)粒中帶有信號(hào)肽的那段異源蛋白，電泳檢測(cè)的一條帶僅能表明某一產(chǎn)物的相對(duì)含量高，是否有少量的其他雜質(zhì)還需純化，這樣更嚴(yán)謹(jǐn)些�？赡軙�(huì)含的有培養(yǎng)基中原有的氮源，死亡菌體降解后形成的雜質(zhì)，蛋白質(zhì)翻譯中產(chǎn)生錯(cuò)誤導(dǎo)致的不完整片段及翻譯后加工錯(cuò)誤（如信號(hào)肽切割，糖基化等），嚴(yán)謹(jǐn)期間建議純化后在開展下一步，如果產(chǎn)物性質(zhì)出現(xiàn)非預(yù)期結(jié)果也便于推究原因，僅為個(gè)人建議，供參考，如不妥請(qǐng)指正。 |
3樓2012-08-09 09:25:25
4樓2012-08-09 20:29:36
awvc
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-08-24 13:49:42
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-08-24 13:49:42
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非常抱歉我沒做蛋白純化方面的實(shí)驗(yàn) 也沒經(jīng)驗(yàn) 給你推薦一篇比較詳盡可靠的參考文獻(xiàn)，也許有幫助 1.李春明，彭遠(yuǎn)義，2株黑曲霉植酸酶的分離純化及其酶學(xué)性質(zhì)研究 《西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）》- 2006年4期 2.李春明 ， 彭遠(yuǎn)義 重組酵母E22植酸酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)第3O卷第11期Vo1．30 NO．11 以下是您的咨詢結(jié)果 重組酵母E22植酸酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究 附下載地址：http://www.textsharefiledownload ... 802320516736250.pdf 該咨詢的有效期為10天。 希望有所幫助 祝順利！ |
5樓2012-08-10 21:59:35
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bioleo
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8樓2012-09-19 22:26:08
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9樓2013-04-20 23:07:42
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10樓2013-04-21 12:21:44
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