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zcl88811新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
黑曲霉轉(zhuǎn)化，表達(dá)質(zhì)粒線性化位點(diǎn)選擇
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| 表達(dá)質(zhì)粒，marker質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染黑曲霉，方法是PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化，目前用2個(gè)完整質(zhì)粒（未線性化）共轉(zhuǎn)化能得到轉(zhuǎn)化子，但是轉(zhuǎn)化子只能P出目的基因不能P出marker基因，所以打算用2個(gè)質(zhì)粒的線性化狀態(tài)轉(zhuǎn)化，但是不知道如何選擇線性化位點(diǎn)？表達(dá)質(zhì)粒表達(dá)框是：黑曲霉糖化酶啟動(dòng)子——目的基因——終止子，連在PUC19的MCS上 marker質(zhì)粒表達(dá)框是：構(gòu)巢曲霉GPD啟動(dòng)子——黑曲霉pyrG基因——終止子，就是質(zhì)粒pAN7-1的hph基因替換了我的pyrG基因，我就是問(wèn) 我的線性化位點(diǎn)應(yīng)該選擇哪邊？ |
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2樓2015-11-24 12:25:45
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