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fhang0427

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 微生物發(fā)酵液中蛋白酶（NH4）2SO4沉淀

微生物發(fā)酵液中有所需的酶但是該菌也產(chǎn)生多糖（產(chǎn)量較高），用（NH4）2SO4沉淀法，70%左右酶與多糖同時(shí)沉下了，此時(shí)回收率也不高僅14%
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fhang0427

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1樓 2013-10-21 21:56:11

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引用回帖:

2樓: Originally posted by huangjixiang at 2013-10-22 09:39:29
蛋白酶沉淀的話應(yīng)該用不了70%的硫酸銨飽和度，30-50%應(yīng)該夠了，這個(gè)濃度下多糖可能不會(huì)沉淀那么多，建議做個(gè)硫酸銨濃度實(shí)驗(yàn)，看看那個(gè)濃度下沉淀出來(lái)的酶活濃度最高

我分別作了40%、50%、60%、70%、80%，40%、50%和80%酶活均很低，60%和70%酶活稍微高一些

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3樓2013-10-22 10:34:46

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huangjixiang

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

蛋白酶沉淀的話應(yīng)該用不了70%的硫酸銨飽和度，30-50%應(yīng)該夠了，這個(gè)濃度下多糖可能不會(huì)沉淀那么多，建議做個(gè)硫酸銨濃度實(shí)驗(yàn)，看看那個(gè)濃度下沉淀出來(lái)的酶活濃度最高

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2樓2013-10-22 09:39:29

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noflower110

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【答案】應(yīng)助回帖

發(fā)酵液的PH會(huì)不會(huì)蛋白酶的對(duì)鹽析效果有影響，我們這邊調(diào)過(guò)PH再進(jìn)行鹽析

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4樓2013-11-02 22:01:37

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一般發(fā)酵后體系pH在5.7左右。
你們實(shí)驗(yàn)室一般將pH調(diào)至多少？酶在（NH4）2SO4多少濃度可以沉下來(lái)？

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5樓2013-11-07 20:56:12

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