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w雨過天晴j新蟲 (初入文壇)
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[求助]
新手請教分子克隆問題???
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| 已經(jīng)找公司合成了一段目的基因,合成的是單鏈,加的有酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基,約60個bp吧,限制酶是NEB的kpn1和hindiii,我想問的是公司合成回來那段是粉末形式的吧,我該怎么溶解和退火成雙鏈,體系該怎么設(shè)置??還有回來要做載體和目的基因的酶切,這個體系又怎么設(shè)置???希望有經(jīng)驗的前輩可以為我這個新蟲詳細(xì)講解一下整個流程哪一步該做什么,自己沒做過沒什么頭緒,萬分感激呀呀。。! |
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