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hea123新蟲 (初入文壇)
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[求助]
用雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量時(shí)，脂肪會(huì)對(duì)測量結(jié)果有影響嘛？為什么會(huì)有影響呢？
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| 各種蟲友，弱弱的問一下，用雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量時(shí)，脂肪會(huì)對(duì)測量結(jié)果有影響嘛？為什么會(huì)有影響呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hea123: 金幣+5, ★有幫助 2013-11-02 11:40:05
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hea123: 金幣+5, ★有幫助 2013-11-02 11:40:05
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感覺會(huì)有影響吧，雙縮脲法測蛋白質(zhì)含量的原理是：雙縮脲（NH3CONHCONH3）是兩個(gè)分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵，或能過一個(gè)中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。 紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。測定范圍為1-10mg蛋白質(zhì)。干擾這一測定的物質(zhì)主要有：硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸、甘油、蔗糖等。 注：①蛋白質(zhì)的種類不同，對(duì)發(fā)色程度的影響不大。 ②含脂肪高的樣品應(yīng)預(yù)先用乙醚脫脂后再測定。 脂肪中的脂肪酸在加熱條件下會(huì)與強(qiáng)堿發(fā)生反應(yīng)的吧，對(duì)后面的OD值會(huì)有影響 |
2樓2013-11-01 19:09:46
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