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hea123新蟲 (初入文壇)
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[求助]
用雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí),脂肪會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果有影響嘛?為什么會(huì)有影響呢?
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| 各種蟲友,弱弱的問一下,用雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí),脂肪會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果有影響嘛?為什么會(huì)有影響呢? |
木蟲 (小有名氣)
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感覺會(huì)有影響吧,雙縮脲法測(cè)蛋白質(zhì)含量的原理是:雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩個(gè)分子脲經(jīng)180℃左右加熱,放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物,稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵,或能過一個(gè)中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。 紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。測(cè)定范圍為1-10mg蛋白質(zhì)。干擾這一測(cè)定的物質(zhì)主要有:硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸、甘油、蔗糖等。 注:①蛋白質(zhì)的種類不同,對(duì)發(fā)色程度的影響不大。 ②含脂肪高的樣品應(yīng)預(yù)先用乙醚脫脂后再測(cè)定。 脂肪中的脂肪酸在加熱條件下會(huì)與強(qiáng)堿發(fā)生反應(yīng)的吧,對(duì)后面的OD值會(huì)有影響 |
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